การพัฒนาชุดตรวจคุณภาพการตรวจวินิจฉัยเชื้อ Mycobacterium ที่รวดเร็วด้านอณูชีววิทยา : Development of the quality of diagnostic test for rapid molecular biology of Mycobacterium.

บทคัดย่อ

บทคัดย่อ                                                                                                                                                      

  วัณโรคเป็นสาเหตุหลักของการเจ็บป่วยและการเสียชีวิตในหลายประเทศทั่วโลก ประเทศไทยเป็นหนึ่งใน 22 ประเทศที่มีการระบาดของวัณโรคสูง และปัจจุบันวัณโรคที่ดื้อยาหลายขนาน (MDR-TB) เป็นภาระหนักที่กำลังขยายตัวออกไปเพิ่มขึ้น จำเป็นที่จะต้องพัฒนาและสนับสนุนเทคโนโลยีและกลยุทธ์ใหม่ที่จะช่วยให้เพิ่มความสามารถของโปรแกรมการป้องกัน การวินิจฉัย และการรักษา เริ่มมีการตรวจวัณโรคด้วยวิธีอณูชีววิทยาเพิ่มมากขึ้นโดยผลตรวจจากห้องปฏิบัติการที่มีคุณภาพจะเป็นข้อมูลสำคัญสำหรับการวินิจฉัยโรคของผู้ป่วย การประเมินคุณภาพห้องปฏิบัติการโดยองค์กรภายนอกจึงเป็นกลไกหนึ่งที่สำคัญของระบบประกันคุณภาพ เพื่อให้ผลตรวจมีความถูกต้อง แม่นยำ ตามมาตรฐานวิชาชีพ และเป็นมาตรฐานสากลเดียวกัน อย่างไรก็ตามการควบคุมคุณภาพภายนอกสำหรับการตรวจด้วยเทคนิคนี้ยังไม่มีหน่วยงานที่เปิดให้บริการในประเทศ ดังนั้นกลุ่มปฏิบัติการอ้างอิงชันสูตรวัณโรคแห่งชาติจึงได้เริ่มการพัฒนาชุดตรวจคุณภาพการตรวจวินิจฉัยเชื้อ Mycobacterium ที่รวดเร็วด้วยวิธีอณูชีววิทยาเพื่อใช้ในโครงการประเมินคุณภาพห้องปฏิบัติการด้านการตรวจหาเชื้อวัณโรคด้วยวิธีอณูชีววิทยาโดยใช้วิธี Dry Tube Culture Spot (DCS) ปริมาณเชื้อที่เหมาะสมสำหรับการเตรียมตัวอย่างชุดตรวจคุณภาพ คือ เชื้อที่ความเข้มข้นเทียบเท่ากับ Macfarland No.1 หรือปริมาณเชื้อเท่ากับ 10⁽⁷⁾ เซล/มิลลิลิตร จำนวน 0.1 มิลลิลิตร และการเตรียมเชื้อในสภาพที่เหมาะสมสำหรับการส่งตรวจโดยเตรียมตัวอย่าง 5 ตัวอย่าง ๆ ละ 100 หลอด แล้วสุ่มมาทดสอบร้อยละ12 รวมตัวอย่างทั้งหมด 60 ตัวอย่าง แบ่งตัวอย่างออกเป็น 2 ส่วนเพื่อทดสอบด้วยเทคนิค Line Probe Assay: Genotype (HAIN test) และ Xpert MTB/RIF อย่างละ 30 ตัวอย่าง ให้ผลตรงกับเชื้อมาตรฐานร้อยละ 100 และ ร้อยละ 97 ตามลำดับ

Abstract                                                                                                                                   

Mycobacterium tuberculosis or TB is a leading cause of both morbidity and mortality in many countries worldwide. Thailand is one of the highest TB-burden countries and currently the estimate of the multi-drug resistant TB (MDR-TB) burden is increasing overtime. To response to fight against Mycobacterium tuberculosis epidemic in Thailand, it is a need to develop and support new technologies and strategies that would allow the expansion of prevention, diagnosis and treatment programs. Molecular technique for detecting Mycobacterium tuberculosis is an efficient tool for diagnosis and treatment of Mycobacterium tuberculosis. In Thailand, this technique has been increasingly used for diagnosis Mycobacterium tuberculosis. The high quality of laboratory results can have a positive impact on diagnosis.  The External Quality Assessment (EQA) is one of the major mechanisms of to ensure the quality of laboratory according to professional standards and other international standards.  However, no any agency in the country runs the EQA program for TB molecular technique.  Therefore, the national TB reference laboratory has developed the EQA sample for TB molecular diagnosis test for using in external quality assessment program for TB molecular test in Thailand. To prepare the EQA sample, Dry Tube Culture Spot (DCS) is selected. The concentration of TB bacilli is by comparing with Macfarland No.1 and equal 10⁷cell/ml. Using 0.1 ml of this solution is put in the tube and dry. We use 5 difference stains of TB to prepare DCS. Each stain was prepared 100 tubes and then random for checking 12 tubes (12%). The just in total of 60 tubes; 30 tubes were performed by using LPA: Genotype (HAIN test) and other 30 tubes using Xpert MTB/RIF test for rechecking. The result showed that 100% and 97% in comparable with standard by using LPA genotype (HAIN test) and Xpert MTB/RIF test, respectively.