การตรวจวัณโรคแบบเร็วโดยใช้ LAMP test ตรวจเสมหะโดยตรงและตรวจจำแนกเชื้อที่เพาะขึ้น

บทคัดย่อ

LAMP หรือ Loop-mediated isothermal amplification เป็นวิธีการใหม่ใช้ในการตรวจวิเคราะห์ DNA ที่สังเคราะห์ในหลอดทดสอบโดยใช้เอนไซม์ทำปฏิกิริยาที่อุณหภูมิคงที่ (65°C) ไม่ต้องใช้เครื่อง PCR และตรวจสอบผลโดยการสังเกตสีด้วยตาเปล่า อ่านผลได้ภายใน 2 ชั่วโมง เนื่องจากเชื้อวัณโรคเจริญช้า การเพาะเชื้อจะใช้เวลา การพัฒนาและใช้ LAMP ในการตรวจวัณโรค จะช่วยวินิจฉัยวัณโรคได้รวดเร็วขึ้น งานวิจัยนี้ได้พัฒนา LAMP test ที่จำเพาะต่อเชื้อวัณโรค มี DNA เป้าหมายในการตรวจสอบเป็นส่วนของ 16S TRNA ยืน จำนวนเชื้อต่ำสุดที่ตรวจวิเคราะห์ได้ประมาณ 9 เซลล์ ผลการประเมินประสิทธิภาพ LAMP test ในการตรวจวัณโรคแบบเร็วโดยตรวจเสมหะโดยตรง กลุ่มตัวอย่างเสมหะที่มีผลตรวจย้อมพบเชื้อติดสีทนกรดและผลเพาะเชื้อพบเชื้อวัณโรค (AFB+, TB culture+) จำนวน 73 ตัวอย่าง ทุกตัวอย่างให้ผลบวก LAMP กลุ่ม ตัวอย่างเสมหะที่ตรวจไม่พบเชื้อติดสีทนกรดแต่มีผลเพาะเชื้อพบเชื้อวัณโรค (AFB, TB culturet) จำนวน 20 ตัวอย่างให้ผลบวก LAMP 15 ตัวอย่าง การใช้ LAMP test ในการจำแนกเชื้อวัณโรคอย่างเร็วจากเชื้อที่เพาะ ขึ้นบนอาหารเลี้ยงเชื้อชนิดอาหารเหลว MGIT จำนวนเสมหะ 135 ตัวอย่าง เพาะเชื้อขึ้น 99 ตัวอย่างให้ผลบวก LAMP test จำนวน 96 ตัวอย่าง ร้ผลภายใน 2 ชั่วโมง บ่งชี้เป็นเชื้อวัณโรค สอดคล้องกับผลตรวจชีวเคมีโดยทดสอบ Niacin, Nitrate และ Catalase ซึ่งใช้เวลาในการจำแนกเชื้อหลายสัปดาห์ สามารถใช้จำแนกเชื้อ ที่เพาะขึ้นบนอาหารแข็งเป็นเชื้อวัณโรคเช่นเดียวกับเชื้อที่เพาะขึ้นในอาหารเหลววิธีการนี้ให้ผลตรวจรวดเร็วมาก ง่าย ไม่ต้องใช้เครื่องมือซับซ้อน เพิ่มประสิทธิภาพในการตรวจวินิจฉัยวัณโรค เหมาะสมที่จะนำไปใช้ประโยชน์ต่อไป